青牛胆根插繁殖试验
摘要：以野生青牛胆的根作为试验材料，研究不同扦插根长对扦插的影响，选出最适根长后，探究了不同基质、不同生长调节剂和浓度处理对青牛胆根扦插的影响。结果表明，12cm的扦插根长、壤土+河沙（1︰1）的扦插基质和1.0mg/L的萘乙酸处理，为青牛胆扦插效果的最佳组合。
青牛胆[Tinosporasagittata(Oliv.)Gagnep.]是防己科（Menispermaceae）青牛胆属（Tinospora）多年生常绿缠绕藤本植物[1]。其干燥块根为中药金果榄，俗称地苦胆、九龙胆，有清热解毒、利咽、止痛的功效，常用于治疗咽喉肿痛、泄泻、脘腹热痛等症状[2]。现代药理作用研究表明，金果榄具有抗炎镇痛、抑菌、抗应激、抗肿瘤等作用[3-5]，青牛胆作为金果榄基原植物，因市场对金果榄的需求量急剧增加，野生青牛胆被大量采挖，使其野生资源处于濒危状态[6-8]。人工栽培是解决这一问题的主要途径，种苗繁育则是人工栽培的第一步。目前，青牛胆种苗繁育的报道多集中于组织培养[9-12]、种子和藤蔓扦插繁殖[13-14]等，而针对青牛胆根扦插繁殖研究则鲜见报道。
本研究以野生青牛胆的根为试验材料，研究不同扦插根长对扦插的影响，选出最适根长后，探究了不同基质、不同生长调节剂和浓度处理对青牛胆根扦插的影响，旨在为建立科学的青牛胆种苗繁育技术奠定基础。
1材料与方法
1.1试验材料
在雷公山国家级自然保护区内采集生长健康、无病虫害的野生青牛胆，选取大小粗细相同的根作为扦插材料。扦插处理前，将新鲜的青牛胆根切成6个长度处理组，即2cm、4cm、6cm、8cm、10cm、12cm。扦插根的上部切平，基部切成斜口，备用。
1.2插床设置
在雷公山国家级自然保护区九十九实验经营场育苗棚设置插床，插床为地床，占地大小1m2（1m×1m），铺设15cm厚的扦插基质，育苗棚外设置可移动的遮阳网。
1.3试验设计
1.3.1不同扦插根长对青牛胆根扦插的影响。采用单因素试验方法，选用扦插基质为壤土的插床，以6个长度处理组的扦插根进行扦插试验；每个长度处理组切50个扦插根进行扦插，每个长度处理组重复3次，共计18组。120d后统计成活株数、芽高、叶片数，计算成活率。
1.3.2不同扦插基质对青牛胆根扦插的影响。采用单因素试验方法，以6个长度处理组中筛选出的最优扦插根长作为固定条件，分别选用壤土、壤土+河沙（1︰1的体积混合均匀）、黄心土作为扦插基质；每种基质切50个扦插根进行扦插，重复3次，共计9组。120d后统计成活株数、芽高、叶片数，计算成活率。
1.3.3不同生长调节剂浓度对青牛胆根扦插的影响。采用单因素试验方法，将吲哚乙酸（IAA）浓度分别配制成0.1mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L、1.5mg/L，以清水作对照（CK），将6个长度处理组中筛选出的最优扦插根基部分别浸泡在配制好的溶液中12h。同样，将萘乙酸（NAA）与生根粉（ABT）按照吲哚乙酸（IAA）的方式，对筛选出的最优扦插根做浸泡处理。共计15个处理组，每个处理组切50个扦插根，选用扦插基质为壤土的插床进行扦插，每个处理组重复3次，总计45组试验。120d后统计存活株数、芽高、叶片数，计算存活率。
1.4扦插后管理
扦插后，将插床喷透水，每隔2～3ｄ于傍晚人工浇1次水，直至插穗萌发新芽，确保相对湿度保持在85%左右及插床湿润；温度控制在30℃以下，当温度超过30℃时，需进行通风降温处理，并定期清理杂草。
1.5数据分析
运用Excel2010软件进行数据整理，运用SPSS27.0.1软件进行方差分析和多重比较，运用Origin2022软件制图。方差分析前先进行数据检验，若数据不符合正态分布，则先采用初级函数，将数据进行转换，以满足正态分布假设[13，15]。
2结果分析
2.1不同扦插根长对根扦插的影响
由表1可知，随着扦插根长的增加，成活率、芽高、叶片数都随之增加，根长为12cm时，成活率34.00%±2.83%、芽高5.80±0.42cm和叶片数7.50±0.71分别达到最大值；成活率、芽高、叶片数随着根长的增加，差异达到显著水平。扦插根长对成活率的影响差异显著，（P=0.000＜0.05）；对芽高的影响差异显著，（P=0.027＜0.05）；对叶片数的影响差异不显著，（P=0.078＞0.05）。综合来看，根长12cm时扦插效果最佳。
2.2不同扦插基质对根扦插的影响
由表2可知，不同扦插基质对成活率的影响差异显著（P=0.013＜0.05）；对芽高的影响差异不显著（P=0.0.130＞0.05）；对叶片数的影响差异不显著（P=0.202＞0.05）。从均值来看，对成活率、芽高、叶片数的影响从大到小依次为：壤土+河沙（1∶1）＞壤土＞黄心土。综合来看，壤土+河沙（1∶1）的扦插基质对12cm的根长扦插效果最佳，成活率、芽高、叶片数分别为41.00%±1.41%、6.55±0.35cm和9.00±1.41片。
2.3不同生长调节剂及浓度处理对根扦插的影响
2.3.1吲哚乙酸（IAA）对根扦插的影响。由表3可知，0.1mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L和1.5mg/L的IAA处理后，根扦插的成活率、芽高、叶片数均低于对照。不同浓度的IAA处理对成活率的影响差异显著（P=0.011＜0.05）；对芽高的影响差异显著（P=0.002＜0.05）；对叶片数的影响差异显著（P=0.018＜0.05）。从均值看，随着IAA浓度的增加，成活率、芽高及叶片数均呈现先增后减的趋势，IAA浓度为1.0mg/L时，成活率、芽高及叶片数达到最大值，分别为19.00%±1.41%、3.90±0.35cm和4.50±1.41片。
2.3.2萘乙酸（NAA）对根扦插的影响。由表4可知，0.1mg/L和0.5mg/L的NAA处理后，根扦插的成活率、芽高、叶片数均低于对照；1.0mg/L和1.5mg/L的NAA处理后，根扦插的成活率、芽高、叶片数均高于对照。不同浓度的NAA处理对成活率的影响差异显著（P=0.000＜0.05）；对芽高的影响差异显著（P=0.002＜0.05）；对叶片数的影响差异显著（P=0.028＜0.05）。从均值看，随着NAA浓度的增加，成活率、芽高及叶片数均呈现先增后减的趋势，NAA浓度为1.0mg/L时，成活率、芽高及叶片数达到最大值，分别为52.00%±2.83%、6.65±0.35cm和9.00±1.41片。
2.3.3生根粉（ABT）对根扦插的影响。由表5可知，0.1mg/L、0.5mg/L和1.5mg/L的ABT处理后，根扦插的成活率、芽高、叶片数均低于对照；1.0mg/L的ABT处理后，根扦插的成活率、芽高、叶片数均高于对照。不同浓度的ABT对成活率影响差异显著（P=0.002＜0.05）；对芽高的影响差异显著（P=0.000＜0.05）；对叶片数的影响差异显著（P=0.014＜0.05）。从均值看，随着ABT浓度的增加，成活率、芽高及叶片数均呈先增后减的趋势，ABT浓度为1.0mg/L时，成活率、芽高及叶片数达到最大值，分别为40.00%±5.66%、5.95±0.35cm和7.50±1.41片。
由表3、表4、表5可知，不同生长调节剂对根扦插成活率、芽高、叶片数的影响差异显著（P值均为0.000＜0.05）；不同生长调节剂浓度对根扦插成活率、芽高、叶片数的影响差异显著（P值均为0.000＜0.05）；不同生长调节剂及浓度处理对根扦插成活率的交叉影响差异显著（P=0.019＜0.05），对芽高的交叉影响差异显著（P=0.000＜0.05），对叶片数的交叉影响差异不显著（p=0.064＞0.05）。
从均值看，随着生长调节剂浓度的增加，成活率、芽高及叶片数均呈先增后减的趋势，生长调节剂浓度为1.0mg/L时，三者达到最大值；3种生长调节剂对成活率、芽高、叶片数的影响从大到小依次为：萘乙酸＞生根粉＞吲哚乙酸。综合来看，1.0mg/L的萘乙酸处理对12cm的根长扦插效果最佳，成活率、芽高、叶片数分别为52.00%±2.83%、6.65±0.42cm和9.00±0.71片。
3结论与讨论
扦插成功与否的关键是插穗是否能够生根，而插穗采集部位、扦插基质、植物生长调节剂处理等对扦插生根具有显著影响[13-15]。本研究表明，不同扦插根长对成活率、芽高、叶片数的影响显著，并呈正相关；壤土+河沙（1︰1）的基质因具有良好的透气性和保水性，扦插效果最佳，而黄心土基质虽然吸水性强，但因透气性差，扦插效果最差；萘乙酸浓度为1.0mg/L、1.5mg/L时，对扦插的成活率、芽高、叶片数具有促进作用，其他浓度则表现出降低作用；生根粉浓度为1.0mg/L时，对根扦插成活率和叶片数具有促进作用，其他浓度与吲哚乙酸所有浓度的处理效果一致，导致成活率、芽高以及叶片数降低。这与朱富勇等[14]研究中不同激素处理均降低了青牛胆藤蔓扦插成活率的结论相似。
综上所述，青牛胆根扦插的最优根长为12cm，扦插基质是将壤土与河沙按1︰1混合，生长调节剂为1.0mg/L的萘乙酸。在本研究中，青牛胆根的扦插成活率相对较低，因此，对于不同扦插根长度、不同扦插基质配比以及其他生长调节剂和浓度处理对青牛胆根扦插效果的影响仍需开展进一步研究，以找寻更有利于青牛胆根扦插繁殖的最优组合。
