1材料与方法
1.1实验材料
本实验研究培养对象为北海道黄杨侧芽,在优良生长的黄杨植株上,选取当年生的健壮的枝条,并选用饱满而未萌发的侧芽作为外植体培养。
1.2试验方法
(1)外植体处理。将枝条冲洗后切去叶片,剥去叶柄,自来水冲洗干净,擦干,将有芽部位的枝条切成2-3cm的一段。将植物材料放在超净工作台上一个有磨口的玻璃瓶中,倒入75%的乙醇淹没外植体,轻晃除去所附气泡,经过10-20S,将乙醇倾去,以无菌操作用无菌水冲洗外植体。
用0. 1%的氯化汞溶液浸泡外植体5-15m in,消毒时间视材料而定,本材料需要8-lOmin的时间消毒。
火菌后,倾出消毒液,注入适量的无菌水,反复冲洗8-10遍,每次3min,用无菌纱布把消过毒的外植体吸干水分,放于火菌的培养皿上。按着无菌操作的程序将外植体进行适宜的修剪、分割后接种到经过火菌的培养基上。
(2)诱导培养基验。诱导培养选用MS培养基。
培养条件:环境温度20士2 0C,光照20001x,每天光照时间10-12h能故障。每种培养基接种100个材料,4周后统计生长情况。(如表)