孙瑞芳，何定萍
摘要：研究表明，适宜钻石玫瑰离体茅诱导分化的培养基为MS+ 6-BA0.50 mg/L+ NAAO.10 - 0.20 mg/L;适宜丛生茅继代增殖的培养基为MS+ 6-BAI.OO mg/L+ NAAO.IO - 0.20 mg/L;适宜试管苗生根的培养基为1/2MS+ NAAO.IO mg/L，其生根率达90%。
关键词：钻石玫瑰；组织培养；繁殖；培养基
钻石玫瑰为月季花中的微型系列品种，因其花枝短小，花朵很小，故名“钻石玫瑰”或“袖珍玫瑰”，属蔷薇科多年生宿根花卉。每株可同时绽放30 - 50朵花，色彩鲜艳，适合园林布置花坛，路带花境，草坪点缀，也适合盆花造型，美化家庭住宅，点缀厅堂居室，深受广大群众的喜爱。它除具有一般月季花容秀美、千姿百态、芳香馥郁、四季常开等特点外，还具有分枝多、株形灌从状、花美、耐寒、耐热、适应性强、花团锦簇等优点，是现代城市绿化不可替代的材料。
目前钻石玫瑰主要靠扦插繁殖，繁殖率低、速度慢，且后代出现品质降低现象，远远不能满足市场的需求。为此，我们开展了钻石玫瑰组培快繁技术研究，现将结果报道如。
1 材料与方法
1.1材料
供试材料采自重庆市园林绿化科学研究所种植的钻石玫瑰品种“紫色时代”二年生植株。
1.2方法
1.2.1外植体的建立
剪取优良健壮植株当年生枝条中段（带饱满而未萌发的侧芽），用毛刷蘸肥皂水轻轻刷洗后流水冲洗l-2h，再剪成l.O - 1.5 cm带腋芽的茎段；超净台上，将茎段先用70%酒精溶液浸泡30s，无菌水冲洗2-3次，再置于0.1%升汞溶液中消毒9 - 12 min，然后用无菌水冲洗4-5次，以备接种。
1.2.2离体芽的诱导培养
将准备好的钻石玫瑰无菌茎段接种于诱导培养基上诱导萌芽。诱导培养基以MS为基本培养基，附加不同浓度的细胞分裂素6-BA和生长素NAA，分别为：MS+ 6-BA0.30 mg/L+ NAAO.IO mg/L, MS+6-BA0.50 mg/L+NAAO.IO mgL,MS +6-BA0.50 mg/L+NAA0.20 mg/L．MS+6-BAI.O mg/L+NAA0.20 mg/L, MS +6-BA2.00 mg/L+NAAO.IO mg/L。每种培养基均接种20个离体芽，培养6周后统计芽分化率。
1;2.3丛生茅的继代增殖培养
将诱导培养基上已萌发的嫩芽切下转接到4种继代培养基中继代增殖。继代培养基分别为MS+ 6-BA050 mg/L+ NAAO.10 mg/L，MS+6-BAI.OO mg/L+NAAO.IO mg/L,MS+6-BAl.OO mg/L+NAA0.20 mg/L，MS+ 6-BA2.00 mg/L+ NAA0.20 mg/L。每种培养基均接30个嫩芽，接种时单芽茎段高均在1.5 cm以下。培养3周后统计丛生芽的数量以及高于2 cm的芽数。
1.2.4试管苗的生根培养
选取继代培养中生长健壮的丛生芽，剪成2.0 - 2.3 cm长的单芽茎段，转接到生根培养基上。培养基配方为：l/2MS+ NAAO．IO mg/L、1/2MS+IBAO.1 mg/L、1/2MS+NAA0.20 mg/L、l/2MS+IBA0.20 mg/L、1/2MS+ NAA0.50 mgiL、1/2MS+ IBA 0.50 mg/L。每种培
养基接种30个茎段，接种15天后统计幼苗生根情况。
所有供试培养基、MS培养基中的白砂糖浓度均为30.0 g/L，l/2MS培养基中白砂糖浓度为20.0 g/L，琼脂均为3.5 g/L，pH5.8;培养室温度(23±2)℃，光照强度2 000 -3 000 lx，光照时间12 h/d。
2结果与分析
2.1离体芽的诱导
钻石玫瑰离体芽的诱导较慢，接种28天后离体芽才开始萌动，但芽萌动后的生长情况因培养基激素浓度的不同而不同，培养结果统计（表1）表明，在诱导培养过程中，MS+ 6-BA0.30 mg/L+ NAAO.IO mg/L培养基丛生芽少，芽分化宰相对较低(70%)，可能足由于6-BA浓度偏低，但丛十芽往培养基中生长健壮；在MS+ 6-BAI.OO mg/L{ NAA0.20 mg/L培养基上，丛生芽相对较少，芽分化率为105%，H从乍芽生长细弱，说明该培养基中6-BA和NAA浓度配比不当；芷MS{ 6-BA2.00 mg/L+ NAAO.lO mg/L培养基I：离体芽荫动后仅产生愈伤组织，未分化出丛生芽，可能山于6-BA浓度过高；MS} 6-BA0.50 mg/L l NAA0.10 mg/L和MS l 6-BA0.50 mg/L+ NAA0.20 mg/L两种培养基上，离体芽的分化率分别达245%和195%，且丛生芽生长健壮。重复试验后确定适宜离体芽诱导的培养基为MS I 6-BA0.50 mg/L+NAAO.IO - 0.20mg/L。
2.2丛生芽的继代增殖
钻石玫瑰在所采用的4种继代增殖培养基上培养3周后，芽的增殖倍数和人J"2 cm芽的比率存在差异（表2）。其中：在MS+ 6-BAI.OO mg/L NAAO.IO mg/L、MS} 6-BAI.OO mg/L+ NAA0.20 mg/L两种培养基上，增殖的丛生芽多，且芽生长健壮：，芽的增殖倍数分别为5.67倍和5.2倍，大干2 cm芽占75.2g%和71.7g%，明显高于其它培养基；在MS+ 6-BA0.50 mg/L l NAAO.lO mg/L培养基上，芽生长细弱，丛生芽少，增殖倍数仅为2.1倍，大于2 cm的芽^18.75%；MS+ 6-BA2.00 mg/L I NAA0.20 mg/L培养基可能因6-BA浓度过高，继代芽产生愈伤组纵后停止牛长分化。蘑复多次结果同上。山此可见，适宜钻石玫瑰继代增殖的培养荩为MS}6-BAI.OO mgfL} NAAO.IO -0.20mg/L。
2.4生根试管苗的驯化移栽
将生根试管苗放在光线明亮的地方，闭瓶炼苗2-3天，再逐渐开瓶炼苗2-3天，让植株经受试管外环境的锻炼。然后，取出试管苗洗净基部牯附的培养基，栽在用珍珠岩、腐殖土、炉渣(1：3：3)配成的基质中，浇浓度为0.8 g/L多菌灵溶液，遮荫保湿，空气湿度保持在60%一70%，当植株长出新根后让其逐渐见光，并降低湿度，直至暴露在外界条件下，移栽成活率可达75% - 80%。
3小结
3.1细胞分裂素6-BA和生长素NAA作为外源激素加入培养基后，对钻石玫瑰离体芽的诱导及分化影响十分显著。适宜钻石玫瑰离体芽诱导的培养基为：MS+6-BA0.50 mgtL+NAAO.IO - 0.20 mg/L;适宜丛生芽继代增殖的培养基为MS+6-BAI.OO mg/L+NAAO.10 -0.20mg/L。
3.2钻石玫瑰在试管内生根需较低浓度的生长素NAA和IBA，当NAA大于2．Omg/L时，钻石玫瑰虽能产生根，但根随即变成灰褐色而停止生长。试验表明，诱导钻石玫瑰试管苗生根的最好培养基为l/2MS+ NAAO.IO mg/L，生根率可达90%。
3.3 用组织培养方法可以提高钻石玫瑰的繁殖速度，且植株根系发达，生长健壮，苗木整齐，是批量繁殖生产钻石玫瑰商品苗的一种好方法。
