光皮树无性繁殖技术
3.1嫁接繁殖
目前,我国已成功实现光皮树嫁接成活率高达90%的技术突破,依据光皮树的生物学特性,主要采用枝接中的腹接法。将1年生光皮树实生苗作为砧木,接穗选自成年结果母树上无病虫害、芽饱满健壮的发育枝。整个操作过程分3步:
(1)削穗。在芽上方1.0cm处切断接穗成平滑断口,再在下端芽中点的另一侧方同样1.8cm处,斜削成45°光滑斜面;
(2)削砧切接。在离地10cm左右的断砧处选光滑的一侧,从断面往下直削一刀,长2.7~3.2cm,使穗条深达光皮树木质部[9];
(3)嫁接与包扎。将伤口处包扎严实,使形成层能更好地愈合,提高光皮树嫁接成活率。
(1)削穗。在芽上方1.0cm处切断接穗成平滑断口,再在下端芽中点的另一侧方同样1.8cm处,斜削成45°光滑斜面;
(2)削砧切接。在离地10cm左右的断砧处选光滑的一侧,从断面往下直削一刀,长2.7~3.2cm,使穗条深达光皮树木质部[9];
(3)嫁接与包扎。将伤口处包扎严实,使形成层能更好地愈合,提高光皮树嫁接成活率。
有研究发现,采用“三刀法”嫁接法[10],即以改进接穗削法为突破口,创造出长削面嫁接新技术,在传统枝接基础上,增加一个削面,即“第三刀”,可增加削面长度,使砧穗之间接触面增大,平均成活率达80.5%,显著高于切接法的69%。
适宜嫁接时间为春秋两季,虽然秋季(9月上旬-10月中旬)露芽腹接成活率高达95.7%,但受气温影响,接穗难度较大,而春季(2月下旬-3月中旬)嫁接,操作简便、接芽萌发早、生长迅速,更适合推广应用。蒋丽娟等[11]研究发现,光皮树砧木株高与嫁接成活率并不相关,但光皮树砧木地径粗度、叶片内源生长激素IAA的含量都与嫁接成活率存在显著正相关性,而叶内源激素ABA含量却与嫁接成活率呈负相关。同时,关于光皮树嫁接的育苗操作流程,从采种、削穗、削砧切接,包括嫁接与包扎等环节,都有着精细的管理规范要求。
3.2光皮树扦插繁殖
光皮树萌蘖性强、须根发达,扦插易成活。一般采用嫩枝扦插,选取位于中下部枝段腋芽饱满、无病虫害的1年生半木质化的光皮树枝条,剪成长11~14cm的插穗,将下剪口剪成斜形,上剪口剪成平口形,上剪口距剪口芽0.5cm。扦插时,插穗上芽离地面20~30mm,行株距规格200mm×100mm。扦插完成后,定时喷洒0.5%KMnO4溶液杀菌消毒。
对于光皮树扦插繁殖技术研究,包括外部非生物因子层面,如扦插基质、时间选择、外源生根促进物质的使用及扦插生长环境等;内部生物因子层面,包括母树、采穗品种、穗条年龄、扦插部位、内源植物生长激素等,从而更好地了解扦插生根的调控机理。胡冬南等[12]研究发现,光皮树扦插的理想基质为泥炭土、珍珠岩、黄心土(1∶1∶1)。许琪[13]研究发现,扦插时间适宜在8月中旬进行,插穗最佳选取材料为幼株,且半木质化的枝条。
邵向奎[14]研究发现,使用植物生长调节剂对穗条做速蘸或浸泡处理,对扦插生根率有着显著影响,其中,以200mg/LIBA这一外源激素处理扦插效果最佳,不仅生根时间短,而且生根率达90%以上。李永欣等[15]研究发现,IAA、ZR、ABA、GA这4种内源生长激素的含量与其扦插根原基的形成和生长发育密切相关。为提高扦插成活率,需对光皮树幼苗实施精细化管理,包括及时浇水、适时放风炼苗、病虫害防治等。
邵向奎[14]研究发现,使用植物生长调节剂对穗条做速蘸或浸泡处理,对扦插生根率有着显著影响,其中,以200mg/LIBA这一外源激素处理扦插效果最佳,不仅生根时间短,而且生根率达90%以上。李永欣等[15]研究发现,IAA、ZR、ABA、GA这4种内源生长激素的含量与其扦插根原基的形成和生长发育密切相关。为提高扦插成活率,需对光皮树幼苗实施精细化管理,包括及时浇水、适时放风炼苗、病虫害防治等。
王新其等[16]、万志洲等[17]研究发现,使用生根剂处理后的插穗,能大幅度提高扦插成活率,其中,用200mg/LNAA溶液进行处理,成活率可达69.3%。徐海兵等[18]通过研究证实,100mg/kgNAA或100mg/kgABT生根粉液对插穗基部进行浸条和消毒处理,使得上海明孝陵光皮树扦插种苗平均扦插成活率高达80%,极大满足了当地对光皮树规模化栽培和推广种植的需求。
![光皮树无性繁殖的3个技术](https://img.penjing8.com/202311/17/101037461.jpg)
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3.3光皮树组织培养
从光皮树不同类型外植体、适宜培养基、外源生长调节剂的选择应用等层面,综述近年来光皮树组织培养技术体系的主要研究进展及其在实际应用中面临的难关和未来可用的解决方法,期望能为今后构建光皮树优良且高效的组培快繁体系提出参考意见。
本玛丽等[6]于2010年率先构建了光皮树优良无性系组培无菌体系,通过大量试验,分批处理不同影响因子对其外植体污染率和无菌苗获得率的数据统计,明确最佳外植体应选择在秋季带有顶芽的幼嫩茎段,适合光皮树初代培养的激素配方为MS+2.0mg/L6-BA+0.05mg/LNAA+300mg/LPVP。刘清等[7]分别用光皮树不同部位的外植体,包括无菌发芽种苗上的子叶、胚轴、叶片、顶芽及带有生腋芽的茎段,都成功地离体诱导出愈伤组织。其中,以带有生腋芽的茎段为外植体,诱导愈伤的出愈率高达90%,MS+4mg/L6-BA+0.5mg/LKT为最佳培养基,但均未出现分化现象。
王丽华[19]以光皮树优良单株上的花药为外植体,探究不同消毒方法及不同激素配比的培养基类型,对光皮树花药愈伤组织诱导率和增殖率的数据,统计得出理想的灭菌方式和适宜的初代培养基为MS+1.5mg/L2,4-D+1.0mg/LNAA+0.8mg/LBA。此外,为获得高质量的光皮树原生质体,李昌珠[20]研究发现,以花药愈伤组织作为材料,确定了光皮树花药愈伤组织获得高质量原生质体分离的最佳条件,对构建光皮树转化系统起到了重要作用。
李培旺等[21]为有效构建光皮树花药组织培养体系,选取光皮树不同发育时期的优良无性系小孢子花药为外植体进行愈伤组织的诱导,以细胞学与花药形态观察及酶联免疫检测等技术为支撑,探究不同时期发育的光皮树花药小孢子的花器官形态学特征及其GA、IAA、ZR、ABA等内源生长激素的变化和光皮树小孢子发育状况对花药培养诱导愈伤组织的联系,发现花中内源激素GA与IAA的含量呈极显著正相关,而GA、IAA与ABA的含量呈负相关。对后续探究如何通过调控光皮树内源生长激素之间的稳态来诱导愈伤组织及建立高效光皮树花药组培体系和倍性育种,提供了一定的技术和理论依据。
王丽华[19]以光皮树优良单株上的花药为外植体,探究不同消毒方法及不同激素配比的培养基类型,对光皮树花药愈伤组织诱导率和增殖率的数据,统计得出理想的灭菌方式和适宜的初代培养基为MS+1.5mg/L2,4-D+1.0mg/LNAA+0.8mg/LBA。此外,为获得高质量的光皮树原生质体,李昌珠[20]研究发现,以花药愈伤组织作为材料,确定了光皮树花药愈伤组织获得高质量原生质体分离的最佳条件,对构建光皮树转化系统起到了重要作用。
李培旺等[21]为有效构建光皮树花药组织培养体系,选取光皮树不同发育时期的优良无性系小孢子花药为外植体进行愈伤组织的诱导,以细胞学与花药形态观察及酶联免疫检测等技术为支撑,探究不同时期发育的光皮树花药小孢子的花器官形态学特征及其GA、IAA、ZR、ABA等内源生长激素的变化和光皮树小孢子发育状况对花药培养诱导愈伤组织的联系,发现花中内源激素GA与IAA的含量呈极显著正相关,而GA、IAA与ABA的含量呈负相关。对后续探究如何通过调控光皮树内源生长激素之间的稳态来诱导愈伤组织及建立高效光皮树花药组培体系和倍性育种,提供了一定的技术和理论依据。
光皮树组培工厂化育苗技术体系在我国还处于摸索阶段,主要是由于光皮树自身含有较多单宁和酚类物质,接种后极易出现严重的褐化现象,还未探索出适宜光皮树继代培养基激素种类与配比的最优配方。若能尽早攻克这道技术难关,不仅能克服传统实生苗播种、扦插、嫁接等传统育苗方式存在的问题,而且具备培养条件可人为控制、不受土地空间和时节的制约、生长周期短、繁育率高等诸多优势[22]。通过快速繁殖产生的大量无性系苗木与亲本优良性状保持高度重合,有利于更好地保存种质资源,能满足市场对光皮树优良品种苗木的需求,从而为大面积推广造林提供保障。
4研究展望
目前,光皮树种质资源与无性系选育取得明显研究进展,并在湖南、江西、广东、重庆等地都有良种示范基地和种植资源嫁接圃,再通过嫁接、扦插等方式,对良种进行矮化早实和集约化经营来达到增产增收的效果[23]。嫁接适用性广、操作简便迅速且成活率高,但由于生长季到来后的连续嫁接和高接换冠技术层面上还存在一定的瓶颈,仍有待相关科研人员进一步探究。
结合光皮树属于浅根系树种,须根发达且扦插较易生根的特点,又通过总结繁育栽培实践研究,对扦插时间、插穗选择、保湿措施、适宜基质、外源生长调节剂的种类和浓度配比等内容有了明确认知,有利于更详细了解光皮树生物学特性,并建立较为完善的光皮树扦插繁殖技术体系。
从现有的无性繁殖技术来看,光皮树以扦插繁殖为主、嫁接繁殖为辅,而组培快繁方面的相关研究报道鲜少。建议可通过建立完整的光皮树组织培养优良无性系高效繁育体系,实现工厂化育苗,为规模化培育优良品系及优质种苗奠定材料和技术基础。
结合光皮树属于浅根系树种,须根发达且扦插较易生根的特点,又通过总结繁育栽培实践研究,对扦插时间、插穗选择、保湿措施、适宜基质、外源生长调节剂的种类和浓度配比等内容有了明确认知,有利于更详细了解光皮树生物学特性,并建立较为完善的光皮树扦插繁殖技术体系。
从现有的无性繁殖技术来看,光皮树以扦插繁殖为主、嫁接繁殖为辅,而组培快繁方面的相关研究报道鲜少。建议可通过建立完整的光皮树组织培养优良无性系高效繁育体系,实现工厂化育苗,为规模化培育优良品系及优质种苗奠定材料和技术基础。