摘要：以红叶石楠茎段为材料，采用组织培养方法，研究了红叶石楠的微体快速繁殖技术。结果表明：当年生的半木质化的嫩梢用0.1%的升汞溶液消毒7~8min效果最好；嫩茎启动培养基采用MS+1.5mg/L6-BA+0.5mg/LKT+0.2mg/LNAA效果最好；增殖分化的培养基为MS+2.0mg/L6-BA+2.0mg/LKT+0.1mg/LNAA，增殖率可达4.3倍；生根培养基选用1/2MS+0.5mg/LNAA+1.0mg/LIBA效果最佳。组培苗培养条件为：光照强度1500~2000Lx，光照时间13h/d，培养室温度为23℃。
红叶石楠（Photiniafraseri）是蔷薇科石楠属种间杂交或选育栽培种的统称，因其新梢和嫩叶鲜红而得名[1-2]。红叶石楠于20世纪末引入我国，采用扦插繁殖速度慢，极大地制约了其推广的进程[3]，而运用组织培养技术，可以加快繁殖速度。
近年来，国内外的研究人员对红叶石楠的微体组培快繁进行了一系列的研究，但仍存在增殖倍数低、分化率不高，生根时间较长、生根率较低等问题[4-7]，所以优化红叶石楠的微体快繁技术颇为重要。本研究采用微体快繁的技术，建立高效经济的红叶石楠无性快繁技术体系，不断优化红叶石楠的微体组培快繁技术，具有十分重要的价值。
1材料与方法
1.1试验材料
本试验于2020年5-9月在山东农业工程学院植物组织培养试验室进行，以红叶石楠当年新生半木质化幼嫩枝条为材料。
1.2试验方法
1.2.1初代培养
剪取红叶石楠嫩枝，自来水冲洗2h,在超净工作台上用无菌水冲洗，然后用70%酒精浸泡30s，无菌水冲洗2-3次，然后用0.1%升汞溶液进行消毒，设立不同的升汞灭菌时间(表1)。
每个处理重复3次，每瓶培养基接种1个外植体，半个月内观察污染情况，并记录污染率、死亡率、成活率，筛选出最仕的消毒时间。各处理升汞消毒完毕用无菌水冲洗4-5次，然后接种于MS空白培养基中，获得无菌苗后接种于启动培养基中，启动培养基设置见表2。
1.2.2增殖培养
将诱导的嫩芽从外植体上剪下，切割成2-3芽/段直接插入增殖分化的培养基中，使其进行增殖培养。增殖培养基共6个处理(表3)，每个处理接种20瓶培养基，重复3次，观察增殖情况。
1.2.3生根培养
红叶石楠无根苗长到2-3cm时，剪切成1-1.Scm长的茎段，接入生根培养基中进行生根培养。生根培养基的基本培养基为MS培养基和1/2MS培养基，采用NAA、IBA2种激素，共8个处理（表4）。每个处理接种20瓶培养基，重复3次，20d后观察生根情况。
1.3培养条件
每1L培养基均加入7g琼脂，30g蔗糖。pH值在5.8~6.0之间，培养温度为23℃，光照强度在1500~2000Lx之间，光照时间为13h/d。
2结果与分析
2.1不同灭菌时间对红叶石楠外植体消毒效果影响
由表1可知，不同的消毒时间对外植体的消毒效果不同。消毒效果最好的是T5，污染率低，为6.67%，成活率最高，达90.05%。T4和T6的污染率也较低，但成活率均低于T5，T4与T5差异不显著，T6与T5差异显著。其他处理的污染率均高于T5，差异达显著水平。可见，利用0.1%的升汞灭菌8min，消毒效果最好，成活率最高。
2.2不同培养基配方对红叶石楠诱导生芽的影响
由表2可知，随着6-BA浓度的增加，腋芽的萌发率不断上升，当6-BA浓度达到1.5mg/L时，腋芽萌发率最高，与其他处理差异显著，随后腋芽萌发率降低。6-BA浓度过低或过高都会对红叶石楠的嫩茎启动产生不利影响。因此，红叶石楠嫩茎启动培养最适宜的培养基配方为MS+1.5mg/L6-BA+0.5mg/LKT+0.2mg/LNAA，腋芽萌发率为75.32%，腋芽的生长状况最好。
2.3不同培养基配方对红叶石楠增殖率的影响
由表3可知，不同浓度的不同激素对茎段增殖影响不同。在增殖分化的过程中可以发现，随着KT浓度的增大，红叶石楠的增殖倍数也不断变大，当KT浓度为2.0mg/L时效果最好。然而，随着NAA浓度的增大，红叶石楠的增殖倍数反而降低，可见，高浓度的KT和低浓度的NAA具有促进红叶石楠增殖分化的效果。以T4效果最好，增殖倍数可以达到4.3倍。
2.4不同培养基配方对红叶石楠生根率的影响
不同的基本培养基和不同激素含量对红叶石楠的生根培养影响不同。由表4可知，随着NAA浓度的升高，生根数降低，说明低浓度的NAA对红叶石楠的生根率有促进作用，而高浓度的IBA对红叶石楠的生根率有促进作用。T6、T7、T8与其他的处理差异显著，3个处理中以NAA浓度为0.5mg/L和IBA浓度为1.0mg/L的处理生根率效果最好，生根率达80.56%，生根数最多，与T7差异显著。
3结论与讨论
外植体的选取是一个重要的环节，1-3节太幼嫩，7节后的已木质化，一般选取当年生的半木质化嫩茎的4-6节作为外植体。研究发现，0.1%升汞消毒8min消毒效果最好，而邱国金’s{研究发现0.1%升汞消毒时间为10~15min，刘柏玲等[9]研究发现，用0.1%的HgCl2溶液处理1min即可达到杀菌消毒的目的，可能与外植体的幼嫩程度和取材部位有关。
本研究在嫩茎启动的配方中加入KT激素，效果较好，增殖培养基配方为MS+2.0mg/L6-BA+2.0mg/LKT+0.1mg/LNAA的增殖效果最好，与李士洪[11]的研究结果一致。本研究在培养基中加入KT，发现2.0mg/LKT对增殖有利。生根培养基配方选用1/2MS+0.5mg/LNAA+1.0mg/LIBA效果最佳，pH值保持在5.8~6.0之间。
随着对红叶石楠的深入研究，品质的优良性不断提高[8]，繁殖技术也在不断改进。本研究所筛选出的培养基配方均有效提高了红叶石楠微体繁殖率，但其他培养条件尚需进一步研究。
