不同浓度对姬玉露多肉试管内生根数量的影响 - PenJing8
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不同浓度对姬玉露多肉试管内生根数量的影响

日期:2018-12-24 13:10:02     浏览:57    
核心提示:IBA不同浓度对姬玉露多肉试管内生根数量的影响,如图14所示,以1/2MS培养基为基本培养基时,IBA浓度为0.5mg/L时,芽根的数量最少,当IBA浓度是2.0mg/L时,芽产生的根数最多,为6条(见图16)。当WPM培养基为基本培养基时,IBA浓度为0.5mg/L时,芽根的数量最低,当IBA浓度是2.0mg/L时,芽产生的根数最多,为5条。
 3结果与分析
 
3.1不同消毒方式对姬玉露多肉花葶消毒效果的影响
 
由表4可知,4个消毒时间中,1号污染率最高为57.81%,死亡率最低为0,消毒剂选用0.1%升汞时,数据显示随着消毒时间的增加,花葶的污染率逐渐降低,而死亡率却逐渐升高。由存活率数据可知最佳消毒时间8min,此时污染率为20.36%,死亡率最低为0,存活率最高为79.64%。
 
3.2不同基本培养基对花葶丛生芽诱导的影响
 
以姬玉露多肉花葶为外植体,基本培养基选用MS时,花葶接入培养基第10天时,其基部有少量愈伤产生,花蕾基部开始有芽萌动,在接种30天时,丛生芽叶片展开,芽翠绿且健壮。基本培养基为1/2MS时,花葶接入培养基20天时,长出的丛生芽矮小、细弱。由表5数据可知,在附加相同的激素下,四种培养基中MS培养基诱导的丛生芽数量最多为45个,丛生芽生长平均高度也最高为3.45cm。从表5的生长势的数据看,最佳的也为MS培养基。因此四种培养基在对花葶丛生芽诱导的影响效果为:MS>B5>WPM>1/2MS。最适宜的基本培养基为MS培养基。
 
不同浓度对姬玉露多肉试管内生根数量的影响
 
3.3不同激素及浓度组合对花葶丛生芽诱导的影响
 
以姬玉露多肉花葶为外植体,在接种约15d左右分化产生丛生芽,其表面有较多绿色的小芽点(见图1)。附加不同种类及浓度的激素,见表6中数据可知,不同浓度6-BA与不同浓度IBA组合即1~14号培养基中,当IBA浓度为0.5mg/L,6-BA浓度为2.0mg/L时,丛生芽诱导率最高为58.82%,丛生芽长势良好。当IBA浓度为1.0mg/L,6-BA浓度为2.0mg/L时,丛生芽诱导率最高为65.75%,丛生芽长势好。当NAA浓度为0.5mg/L,6-BA浓度为2.0mg/L时,丛生芽诱导率最高为60.70%,丛生芽长势良好。当NAA浓度为1.0mg/L,6-BA浓度为2.5mg/L时,丛生芽诱导率最高为68.50%,丛生芽长势好(见图2)。综上所述,根据丛生芽诱导率和丛生芽长势,可知最适宜诱导花葶丛生芽的激素组合为:6-BA2.5mg/L+NAA1.0mg/L。
 
3.4不同种类及浓度的激素对花葶丛生芽增殖的影响
 
根据表7数据分析可知,当细胞分裂素选用6-BA时,再分别附加生长素IBA和NAA对比发现,当IBA浓度为0.3mg/L,6-BA浓度为0.5mg/L时,培养过程中发现芽翠绿,矮小,无玻璃化现象,芽平均增殖系数最高为3.45。当NAA浓度为0.3mg/L,6-BA浓度为0.5mg/L时,芽翠绿,健壮,无玻璃化现象,芽平均增殖系数最高为5.25。因此表7显示出,最适宜花葶丛生芽增殖的激素组合为:6-BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L。
 
根据表8数据分析可知,当细胞分裂素选用KT时,再分别附加生长素IBA和NAA对比发现,当IBA浓度为0.3mg/L,KT浓度为1.0mg/L时,培养过程中发现芽黄绿,细弱,无玻璃化现象(见图3),芽平均增殖系数最高为2.86。当NAA浓度为0.5mg/L,KT浓度为1.0mg/L时,芽翠绿,健壮,无玻璃化现象(见图4),芽平均增殖系数最高为3.95。因此,表8中结果表明,最适宜花葶丛生芽增殖的激素组合为:KT1.0mg/L+NAA0.5mg/L。将表7和表8做对比发现,6-BA与NAA组合优于KT与NAA组合,故最适宜花葶丛生芽增殖的激素组合为:KT1.0mg/L+NAA0.5mg/L。
 
3.5不同消毒方法对叶片消毒的影响
 
以成熟叶片为外植体,本试验采用八种消毒方法,从表9中可以看出,消毒效果最好的方法是编号7:5%NaClO2min+0.1%HgCl28min(附加2滴吐温-20),污染率为3.45%,死亡率较低为6.46%,存活率最高为90.09%。其次是编号6的处理:5%NaClO2min+0.1%HgCl26min(附加2滴吐温-20)处理,存活率可达到81.78%。从编号1~编号4看出,仅用一种消毒剂(0.1%HgCl2、5%NaClO)组合的消毒效果均不是最佳消毒方法,叶片接入培养基三天后出现污染现象,随着培养的继续,污染现象会越来越严重。
 
3.6不同激素及浓度组合对叶片愈伤组织诱导培养的影响
 
以姬玉露叶片为外植体,本试验设计的所有不同激素及浓度组合都可以诱导出愈伤组织,只是诱导出的愈伤组织的状态,愈伤组织的多少及诱导率等都有不同程度的差异。叶片在培养约15d左右,其切口边缘长出少量白色愈伤组织(见图5)。由表10中可以观察出,编号5,13,22,29愈伤诱导率较高,愈伤组织产生的量也较多,但经过对比这四种培养基的愈伤生长状态有差异,5号的状态最好,愈伤组织状态为疏松的黄绿色愈伤,表面呈颗粒状,无褐化现象(见图6)。
 
总体观察来看,由添加2,4-D诱导出的愈伤组织是湿润细密的,后期培养不容易分化,因此附加生长素NAA,优于附加生长素2,4-D。KT附加NAA与6-BA附加NAA做比较,即编号1~8与编号9~16的数据做对比,可以看出1~8的最高出愈率为76.76%,9~16的最高出愈率为69.87%,虽然两者的愈伤组织量都很多,但从出愈率看还是6-BA组合优于KT组合。因此由表10可以得出最适宜叶片愈伤组织诱导的激素组合为:6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L。
 
3.7不同激素及浓度组合对叶片愈伤组织分化培养的影响
 
将叶片愈伤组织放在不同浓度6-BA与NAA以及6-BA与IAA组合的培养基上进行培养,由表11可以看出,18种组合均可以诱导叶片愈伤组织分化出不定芽(见图7)。当生长素选用IAA时的分化率最高为45.27%,当生长素选用NAA时的分化率最高为55.48%,因此生长素NAA优于生长素IAA。编号12的激素组合的叶片愈伤组织分化率最高为55.48%,其次是编号11(见图8)的激素组合叶片愈伤组织分化率为50.54%,两者分化出的芽的生长状态做对比时发现,12号培养基虽然愈伤组织分化率高于11号培养基,但是生长出的芽细弱,且有玻璃化现象,不利于后期壮苗生根培养,因此最适宜的分化培养的激素组合为:6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L。
 
将增殖后的叶片愈伤组织放在不同浓度KT与NAA以及KT与IAA组合的培养基上,由表12可以看出,所有组合均可以诱导分化出不定芽。当生长素选用IAA时的分化率最高为39.55%,当生长素选用NAA时的分化率最高为48.19%,因此生长素NAA优于生长素IAA。编号12的激素组合的愈伤组织分化率最高为48.19%,其次是编号11的激素组合愈伤组织分化率为43.35%,两者分化出的芽的生长状态做对比时发现,11号的激素组合产生的芽更健壮(见图9),但是12号生长出的芽细弱(见图10),不利于后期壮苗生根培养,因此最适宜的分化培养的激素组合为:KT1.0mg/L+NAA0.5mg/L。
 
由表11和表12数据对比可以得出6-BA与NAA组合优于KT与NAA组合,因此最适宜叶片愈伤组织分化培养的激素组合为:6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L。
 
不同浓度对姬玉露多肉试管内生根数量的影响

 
3.8不同激素及浓度对壮苗的影响
 
将分化出的小芽接种在1~12号培养基中,进行壮苗试验。由表13可以看出,当单独使用NAA时,苗叶片平均长度和宽度最长的为编号4,分别为3.5cm、0.8cm(见图11);当单独使用IBA时,苗叶片平均长度和宽度最长的为编号8,分别为3.7cm、1.2cm(见图12)。当单独使用IAA时,苗叶片平均长度和宽度最长的为编号12,分别为2.5cm、0.8cm。三组最佳数据做对比可知当培养基中单独附加IBA1.5mg/L时,姬玉露壮苗效果最好,苗大、健壮、无玻璃化现象。
 
3.9不同激素组合对不定芽生根的影响
 
NAA不同浓度对姬玉露多肉试管内生根数量的影响,如图13所示。以1/2MS培养基为基本培养基时,NAA浓度为2.0mg/L时,芽根的数量最少,当NAA浓度是1.0mg/L时,芽产生的根数最多,为5条。当WPM培养基为基本培养基时,NAA浓度为0.5mg/L时,芽根的数量最低,当NAA浓度是1.5mg/L时,芽产生的根数最多,为5条(见图15)。综上所述,最适生根培养基为:1/2MS+IBA2.0mg/L。
 
IBA不同浓度对姬玉露多肉试管内生根数量的影响,如图14所示,以1/2MS培养基为基本培养基时,IBA浓度为0.5mg/L时,芽根的数量最少,当IBA浓度是2.0mg/L时,芽产生的根数最多,为6条(见图16)。当WPM培养基为基本培养基时,IBA浓度为0.5mg/L时,芽根的数量最低,当IBA浓度是2.0mg/L时,芽产生的根数最多,为5条。
 
 
3.10不同基质对再生植株生长的影响
 
把组培苗经过闭瓶强光锻炼后,从瓶中取出种植在表14的四种经过高温高压灭菌后的基质中。经过2个月的锻炼培养,得出结果:当基质为赤玉土:蛭石:泥炭土=2:2:1时,再生植株的移栽成活率最高为83.33%,生长速度快、健壮。原因可能是此基质透气性好、泥炭土中能提供充足的营养物质,其次是基质赤玉土:蛭石:泥炭土=3:1:1,再生植株移栽成活率为66.67%。因此最适炼苗基质为:赤玉土:蛭石:泥炭土=2:2:1。
 
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